پاورپوینت روش های شناسایی میکروارگانیسم ها

پاورپوینت روش های شناسایی میکروارگانیسم ها (pptx) 43 اسلاید

دسته بندی : پاورپوینت

نوع فایل : PowerPoint (.pptx) ( قابل ویرایش و آماده پرینت )

تعداد اسلاید: 43 اسلاید

قسمتی از متن PowerPoint (.pptx) :

بنام خدا 1 روش های شناسایی میکروارگانیسم ها 2 مقدمه ميكروب شناسي موادغذايي يكي از شاخه هاي علم ميكروبيولوژي است كه كاربرد آن در صنايع غذايي و مراكز تحقيقاتي نيازمند افرادي است كه آموزشهاي لازم را ديده و از تجربه قابل توجهي برخوردار باشند و از سوي ديگر آزمايشگاه مناسبي را در اختيار داشته باشند . در اين راستا روشهاي جداسازي و تشخيص باكتريها بويژه باكتريهاي بيماريزا در مواد غذايي كه به دو روش كلي سنتي و مدرن انجام مي گيرد ، حائز اهميت فراواني است . روشهاي سنتي روشهايي هستند كه غالباً وقت گير بوده و عليرغم كم هزينه بودن همواره براي ميكروبشناسان مشكل ساز هستند و خصوصاً هنگامي كه اعلام سريع نتايج از نظر اقتصادي و پزشكي واجد اهميت است ، اين مشكل بيشتر احساس مي گردد . به عنوان مثال در مورد بعضي از ميكروبهاي مهم بيماريزاي موادغذايي ( نظير سالمونلا ) نياز به صرف چندين روز وقت به دليل تهيه محيط هاي متعددي هستيم . خوشبختانه در روشهاي جديد و سريع كه امروزه براي تشخيص و جداسازي باكتريها مورد استفاده قرار مي گيرند ، اين مشكلات مرتفع گرديده و با تكنيكهاي مبتني بر روشهاي فيزيكي ، شيميايي ، ايمونولوژيكي و ژنتيكي ميتوان در اسرع وقت نتايج را اعلام نمود . 3 روشهاي سنتي در روشهاي سنتي عموماً براساس كشت باكتري در محيطهاي مختلف و توليد كلني هاي قابل رويت در يك محيط جامد انتخابي و انجام آزمايشات بيوشيميايي در محيطهاي مايع است . با توجه به اينكه موادغذايي ، ميكروبهاي بيماري زا غالباً به مقدار نسبتاً كمي وجود داشته و توسط ميكروبهاي عامل فساد ، در موضع مغلوب قرار مي گيرند و از سوي ديگر طي عمليات هاي فرآوري مواد غذايي دچار صدمه مي گرداند ، در نتيجه جداسازي باكتري مورد نظر پيچيده تر بوده و زمان بيشتري را طلب مي كند و به همين دليل جداسازي آنها معمولاً در سه مرحله پيش غني سازي( Pre Enrichment ،( غني سازي ( Enrichment)و كشت در محيط جامد انتخابي ( (Selective Platingصورت مي گيرد . 4 ۱- مرحله پیش غني سازي : اين مرحله كه به آن مرحله احياء ( (Resuscitationنيز گفته مي شود ، براي حفظ تعداد كم باكتريها و التيام باكتريهاي صدمه ديده در فرآيندهاي مختلف ضروري به نظر مي رسد و در مورد بعضي از ميكروبهاي بيماريزا نظير سالمونلا استفاده از يك پيش غني كننده ( مثل محيط لاكتوز براث (Lactose Broth الزامي است . براي انجام اين مرحله از يك محيط غير انتخابي استفاده مي گردد. 5 ۲- مرحله غني سازي : در مواقعي كه تعداد باكتريهاي بيماريزا در نمونه غذايي بسيار كم است ، غني سازي انجام مي گيرد . هدف از اين مرحله رشد ارگانيسم مورد نظر بوده و لذا با استفاده از محيط غني كننده مايع ، باكتريهايي كه بالاترين ضريب رشد GrowthRate را در بين جمعيت ميكروبي آن نمونه غذايي ، دارا باشند در اين محيط رشد خواهند نمود . مثلاً در مورد سالمونلا از محيطهاي سلنيت سيستينSelenit Cistine يا تتراتيوناتTetrationate استفاده مي گردد. اكثر محيطهاي غني سازي از نظر مواد مغذي پيچيده بوده و شرايطي را فراهم مي سازند كه طي آن رشد ميكروارگانيسمهاي رقيب كاهش يابد ويا از رشد آنها جلوگيري شود و تنها باكتري مورد نظر رشد نمايد . لازم به ذكر است در مورد بعضي از باكتريها نظير يرسينا آنتروكوليتيك ( (Yersinia Entrocolitica و ليستريامنوسيتوژنز Listeria Moncytogenes) )به علت سرما دوست بودن ، غني سازي در سرما صورت مي گيرد . 6 3 -مرحله استفاده از محيطهاي جامد انتخابي محيطهاي جامد انتخابي ، محيطهايي هستند كه يك ميكروب يا گروه خاصي از ميكروبها را انتخاب مي كنند. اصول ساخت اين محيط ها مشابه محيطهاي غني كننده مايع است و در تهيه آنها از عوامل مورد نياز براي رشد باكتري استفاده مي گردد. بدين معني كه در تهيه آنها از موادي استفاده مي شود كه باعث مي گردد ميكروب مورد نظر در آن رشد كرده و از ساير ميكروبها تفكيك داده مي شود. 7 البته پيشنهاد مي گردد حتي در مواردي كه پرگنه هاي واضح و تيپيكي در اين محيط ها رشد كرده باشد، بهتر است قبل از نتيجه گيري نهايي، از آزمايشات تاييدي استفاده گردد. به عنوان مثال آزمايشات بيو شيميايي ساده اي نظير كاتالاز Catalase )) اكسيداز(Oxidase ) كوآگولازCoagulase ) )و همچنين رنگ آميزي گرم مي توانند بسيار مفيد واقع شوند. 8 بیشتر روشهای تشخیص و شناسایی میکروارگانیسم ها که در این جا بیان میشوند از سال 1960 تا کنون معرفی شده اند.از بسیاری از این روشها میتوان برای برآورد تعداد سلول ها یا متابولیت های سلولی استفاده نمود.بیشتر روش هایی که به آنها اشاره خواهد شد،برخلاف روشهای شمارش مستقیم میکروسکوپی،بر اساس فعالیت های متابولیکی میکروارگانیسم ها روی سوبستراهای مشخص،اندازگیری عکس العمل رشدی،اندازگیری بخشهایی از سلول مثل اسید نوکلوئیک یا ترکیبی از اینها میباشد. 9